產(chan) 品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體(ti) 係中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個(ge) PCR進程,使每個(ge) 循環變得“可見”。本產(chan) 品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為(wei) 基礎開發的專(zhuan) 門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chan) 品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
艱難梭狀芽孢杆菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Clostridium difficile | EY00P8827 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為(wei) 12個(ge) 月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chu) 存條件:-20℃避光保存,避免反複凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶隻需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們(men) 提取RNA,設計並合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及後續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀(yi) 器及分析報告
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋度為(wei) 例)。由於(yu) 標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬(wan) 不能汙染樣品或本試劑盒的其他成分)。為(wei) 增加產(chan) 品穩定性和避免擴散傳(chuan) 染性病原,本產(chan) 品不提供活體(ti) 樣品做陽性對照,隻提供無傳(chuan) 染性的 DNA 段作為(wei) 陽性對照。
1. 標記 6 個(ge) 離心管,分別為(wei) 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鍾,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鍾,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鍾,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重複上麵的操作直到得到 6 個(ge) 稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的製備
7. 如果有N個(ge) 樣品,設置N+2個(ge) 提取,多出的一個(ge) 是PC(樣品製備陽性對照),一個(ge) 是 NC(樣品製備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體(ti) 積跟每次製備要求的體(ti) 積一樣,以此作為(wei) PC。另外用水作為(wei) NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為(wei) RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體(ti) 係,在樣品製備室進行)
9. 如果做定量分析並且隻做1次重複,則標記N+9個(ge) PCR 管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的 N+2個(ge) 樣品,1個(ge) 用於(yu) PCR陰性對照(用水做模板),6個(ge) 用於(yu) 標準曲線。如果做定性分析,並且隻做1次重複,則標記N+4 個(ge) PCR管,其中N+2個(ge) 用於(yu) 上步得到的N+2個(ge) 樣品,1 個(ge) 用於(yu) PCR 陰性對照(用水做模板),1個(ge) 用於(yu) PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下麵隻以定量分析為(wei) 例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表隻列出一次重複。樣品管和陰性對照設置完畢後才設置陽性對照,並且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chu) 存好後加)
2-氨基-5-溴吡啶-4-羧酸胰腖大豆瓊脂斜麵/TSA/Tryptic Soy Agar N-Acetylimidazole
Meso-四(3,5-二溴-4-羥基苯基)卟啉堿性蛋白腖水/AP 1-(Heptafluorobutyryl)imidazole
聚-L-孟加拉紅瓊脂/孟加拉紅培養(yang) 基/虎紅瓊脂/Rose Bengal Agar Pentafluorobenzyl Bromide
亞(ya) 甲基雙萘磺酸鈉酵母粉葡萄糖瓊脂/YGC瓊脂/YGC Agar O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine Hydrochloride
十七烷Candida Elective 瓊脂/BiGGY瓊脂/坎迪達尼克森選擇性瓊脂/鉍葡萄糖酵母瓊脂/BiGGY Agar Nonane
DA201大孔樹脂DTM培養(yang) 基/DTM Medium Eicosane
N-甲基吲哚氧基乙酸酯DRBC瓊脂/氯硝孟加拉紅瓊脂/氯硝虎紅瓊脂/氯硝玫瑰紅瓊脂/DRBC Agar Heneicosane
D730大孔徑強堿性陰離子樹脂WORT瓊脂/WORT Agar Docosane
美洛培南三水合物WORT肉湯/WORT Broth Tricosane
銅鐵試劑改良綠色酵母菌和真菌肉湯 Tetracosane
鉻片Littman瓊脂/Littman Agar Pentacosane
硫酸鈦DG-18瓊脂/Dichloranglycerol Agar Methyl n-Octanoate
XDA-1B大孔樹脂YM瓊脂/YM Agar Methyl Nonanoate
水溶性霍霍巴油YM肉湯/YM Broth Methyl Laurate
吡咯喹啉醌YM11瓊脂/YM11 Agar Methyl Myristate
艱難梭狀芽孢杆菌探針法PCR熒光定量試劑盒乳酸脫氫酶B(LDHB)(酶聯免疫吸附試驗法) 質量規格:HPLC≥98%,標準品1ml(500X)
乳酸脫氫酶B(LDHB)(酶聯免疫吸附試驗法)(標準品) 質量規格:HPLC≥98%,標準品1ml(500X)
乳酸脫氫酶B(LDHB)(酶聯免疫吸附試驗法)氯屈膦酸二鈉無水 質量規格:HPLC≥98%,標準品6次/盒
血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)(酶聯免疫吸附試驗法)氯屈膦酸二鈉無水 質量規格:≥97%,BR6次/盒
白介素17B(IL17B)(酶聯免疫吸附試驗法)氯屈膦酸二鈉(標準品) 質量規格:HPLC≥98%,標準品1ml(500X)
WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)(酶聯免疫吸附試驗法)米帕明/咪 質量規格:>98%,BR3×1ml
胰澱素(IAPP)(酶聯免疫吸附試驗法)米帕明/咪 質量規格:HPLC≥98%,標準品500 ml
核糖核酸酶A3(RNASE3)(酶聯免疫吸附試驗法)米帕明/咪 質量規格:HPLC≥98%,標準品6次/盒