小鼠原代腎小球係膜原代細胞

細胞培養(yang) 操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yang) 瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態

傳(chuan) 代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳(chuan) 代培養(yang)

傳(chuan) 代代數可傳(chuan) 5代左右；3代以內(nei) 狀態

傳(chuan) 代比例傳(chuan) 代建議1：2傳(chuan) 代，1:2傳(chuan) 代就是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) T25瓶或者2個(ge) 6cm皿。不是1個(ge) T25瓶傳(chuan) 2個(ge) 10cm皿

傳(chuan) 代方法：

1.吸出T25細胞培養(yang) 瓶中的培養(yang) 基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yang) 瓶中，輕微轉動培養(yang) 瓶至消化液覆蓋整個(ge) 培養(yang) 瓶底後，吸出多餘(yu) 消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓後，再加入5ml培養(yang) 基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yang) 瓶傳(chuan) 代，然後補充新鮮的培養(yang) 基至5mL，置於(yu) 37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yang) 箱中靜置培養(yang) ；

4.待細胞貼壁後，培養(yang) 觀察；之後每2-3天換液一次新鮮的培養(yang) 基。

商品屬性：

細胞基本屬性：

種屬來源：小鼠

組織來源：腎腎

生長特性：貼壁生長

產(chan) 品規格：5x105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產(chan) 品貨期：5-6周左右

運輸方式：T25培養(yang) 瓶/ 順豐(feng) 快遞（包郵）

供應限製：僅(jin) 限於(yu) 科學研究，絕不可作為(wei) 動物或人類疾病的治療產(chan) 品使用

背景介紹：:小鼠腎小球係膜細胞采用機械研磨法結合不同孔徑不鏽鋼網篩過濾後使用膠原酶消化製備而來，小鼠腎小球係膜細胞分離自腎小球組織；腎小球是腎元中的用於(yu) 將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢(cong) ，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內(nei) 的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內(nei) ，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之後，形成濾液，滲入鮑氏囊內(nei) 。腎小球與(yu) 鮑氏囊合稱為(wei) 腎小體(ti) ，腎小球的過濾速率便稱為(wei) 腎小球過濾率。腎小球係膜是位於(yu) 腎小球毛細血管袢之間的一種特殊間充質，由係膜細胞和係膜基質組成。腎小球係膜細胞是腎小球內(nei) 非常活躍的細胞，具有分泌細胞基質、產(chan) 生細胞因子、吞噬和清除大分子物質及類似平滑肌細胞收縮的功能。腎小球係膜細胞增生和基質的過多產(chan) 生是多種腎小球腎炎的主要病理表現。腎小球係膜細胞的培養(yang) 是研究係膜擴張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法。係膜細胞的主要作用可能有：①收縮作用，入球小動脈和出球動脈的收縮作用受係膜細胞的調節，以影響毛細血管袢的內(nei) 壓和濾過率；②支持作用，它填充於(yu) 毛細血管袢之間，支持毛細血管的位置；③吞噬作用，能吞噬被阻留在基膜內(nei) 的大分子物質和蛋白質；④分泌腎素，在腎缺血或免疫複合物沉積時，係膜細胞增生且分泌腎素。腎係膜細胞是腎小球內(nei) 非常活躍的細胞，具有分泌細胞基質、產(chan) 生細胞因子、吞噬和清除大分子物質及類似平滑肌細胞收縮的功能。同時還可產(chan) 生和降解多種細胞外基質，參與(yu) 係膜基質及腎小球基底膜的修複與(yu) 更新，在腎小球生理功能和病理反應中起著重要作用。

原代細胞培養(yang) 的主要步驟包括：

‌一、剝離組織，去除外膜、結締組織等‌：將組織從(cong) 動物體(ti) 中取出，並去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、‌洗滌後將組織剪成1mm左右的小塊‌：使用生理鹽水或其他適當的緩衝(chong) 液洗滌組織，然後將其剪成約1mm大小的小塊。

三、‌用0.1%～0.2%的消化‌：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩衝(chong) 液中，進行消化。消化時間可根據具體(ti) 實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

‌四、吹打分散後，過濾、計數‌：將消化後的細胞吹打到一個(ge) 離心管中，然後過濾、計數。

五、‌按30萬(wan) /毫升分瓶培養(yang) ‌：將計數後的細胞按30萬(wan) /毫升的濃度分瓶培養(yang) 。

公司正在出售的產(chan) 品：