公司細胞廣泛用於(yu) 國內(nei) 院校的細胞生物學研究,作為(wei) 實驗項目研究。下列產(chan) 品詳細介紹:
產(chan) 品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
家貓皮膚細胞;FCA-S1 | 貼壁生長 | EY-X63763 |
細胞名稱 家貓皮膚細胞;FCA-S1
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞係來源於(yu) 一雄性家貓的皮膚組織。2000年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yang) 條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳(chuan) 代方法: 1:2傳(chuan) 代;3-4天一次
傳(chuan) 代情況: P3
凍存條件: 基礎培養(yang) 基+8%DMSO+20%FBS
支原體(ti) 檢測: 熒光法(-)
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置於(yu) 4℃ 30~60 分鍾→ (-20 ℃30 分鍾*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chu) 存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置於(yu) 已設定程序之可程序降溫機中每分鍾降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chu) 存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用於(yu) 貼壁細胞培養(yang) ,而不適用於(yu) 懸浮細胞培養(yang) ,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為(wei) 優(you) 質玻璃,並經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養(yang) 皿,但不宜過大,以避免培養(yang) 液的浪費和增加汙染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹。
實驗報告:
一、分離與(yu) 培養(yang) :
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然後用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之後用滴管吹打製成單細胞懸液,自然沉澱並收集上清,用含10% FBS培養(yang) 基終止消化後4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min後,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置,重複此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yang) 基混懸,接種於(yu) 25cm2培養(yang) 瓶,放置於(yu) 37℃ ,5%CO2 培養(yang) 箱中培養(yang) ;
5、差速貼壁1h後,吸出培養(yang) 基,按實驗需要接種於(yu) 6孔板中繼續培養(yang) ;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yang) 基,用溫育的PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS衝(chong) 洗細胞2次,每次10min,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS衝(chong) 洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS衝(chong) 洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照。
H-ras檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠成纖維細胞;φ2形態特性: 成纖維細胞樣H-ras
IFN-γR1-CDw119檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14[SP20]形態特性: 淋巴母細胞樣;圓形IFN-γR1-CDw119
KIT Ligand檢測試劑盒細胞名稱: 人腎上腺皮質癌細胞;SW-13形態特性: 上皮樣;多角KIT Ligand
L1細胞粘附分子檢測試劑盒細胞名稱: 人結直腸癌細胞;T84形態特性: 上皮樣;多角L1 cell adhesion molecule
Laminin-5;Epiligrin檢測試劑盒細胞名稱: 人神經膠質細胞瘤細胞;U251形態特性: 多角Laminin-5;Epiligrin
Mac-2結合蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人急性單核細胞白血病細胞;THP-1形態特性: 單核細胞 Mac-2BP
MEK激酶檢測試劑盒細胞名稱: 非洲綠猴腎細胞;VERO形態特性: 上皮樣細胞MEK
MEST檢測試劑盒細胞名稱: 人組織細胞淋巴瘤細胞;U937[U-937]形態特性: 單核細胞Mesoderm-specific transcript homolog protein
microRNA-210檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠垂體(ti) 瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20形態特性: 小圓形細胞microRNA-210
Spondin-2;mindin檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠小膠質細胞;BV2形態特性: 多形型Spondin-2
MRP-14檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠骨髓瘤細胞;Fox-NY形態特性: 淋巴母細胞樣Myeloid-related portein8;14
腎上腺髓質前體(ti) 中段肽檢測試劑盒細胞名稱: 人胃腺癌細胞;BGC-823形態特性: 上皮樣midregional fragment of pro-adrenomedullin
MxA蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-1形態特性: 多角MxA Protein
NADH-細胞色素b5還原酶檢測試劑盒細胞名稱: 人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1形態特性: 成纖維細胞樣NADHcytochrome b5 reductase
NOD樣受體(ti) 1檢測試劑盒細胞名稱: 人纖維肉瘤細胞;HT-1080形態特性: 上皮樣NOD-1
NOD樣受體(ti) -2檢測試劑盒細胞名稱: 人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16形態特性: 上皮樣;多角NOD-2
OX40 Ligand檢測試劑盒細胞名稱: TNFa轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFa形態特性: 上皮樣;多角OX40 Ligand
家貓皮膚細胞;FCA-S1LB瓊脂(lennox)規格:250g用途:用於(yu) 分子生物學中大腸杆菌的培養(yang)
桑塔斯瓊脂培養(yang) 基規格:詳情介紹
大腸杆菌成套生化鑒定管(DCSN)規格:4種*4套用途:用於(yu) 大腸杆菌的IMVC生化鑒定組成:蛋白腖水(色氨肉湯)4支、MR-VP 8支、Korser氏枸櫞鹽肉湯4支。(需甲基紅試劑盒、V-P試劑盒、Kovace靛基質試劑盒配套使用)
含酶的TSA表麵接觸皿(55mm)規格:10個(ge) /包用途:用於(yu) 環境、器皿、設備和表麵的無菌檢測。
無菌均質袋(32cm*20cm)(不帶壓條)規格:100個(ge) /包用途:用於(yu) 樣品的均質
克氏雙糖鐵瓊脂規格:250g用途:用於(yu) 細菌複合生化試驗(葡萄糖,乳糖)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yang) 液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yang) 液洗滌細胞一次,以去除殘餘(yu) 的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,並且肉眼觀察培養(yang) 器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yang) 液,吹打下細胞,即可直接用於(yu) 後續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從(cong) 培養(yang) 器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yang) 液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉澱細胞,盡量去除細胞消化液後,加入含血清的*培養(yang) 液重新懸浮細胞,即可用於(yu) 後續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化後可以充分打散組織為(wei) 宜。