操作步驟
1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然後在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。   
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此重複5次，拍幹。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鍾.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液後15分鍾以內(nei) 進行。

計算和結果判定：
  試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
  臨(lin) 界值（CUT OFF）計算：臨(lin) 界值=陰性對照孔平均值+0.15
  陰性判定：樣品OD值< 臨(lin) 界值（CUT OFF）者為(wei) A型口蹄疫抗體(ti) （FMDV-A Ab）陰性
  陽性判定：樣品OD值≥ 臨(lin) 界值（CUT OFF）者為(wei) A型口蹄疫抗體(ti) （FMDV-A Ab）陽性