T-2毒素測定檢查步驟

  T-2毒素主要影響血液，肝髒，腎髒，胰腺肌肉及淋巴細胞的功能，T-2毒素中毒後的一般臨(lin) 床症狀為(wei) 厭食、嘔吐、腹瀉、生長停滯、繁殖和神經性能障礙等。本試劑盒是應用ELISA技術的新一代真菌毒素檢測產(chan) 品，操縱時間短於(yu) 60min，能zui大限度地減少操縱誤差和工作強度。使用T2毒素試劑盒則能夠快速而正確的分析樣品中T2毒素殘留，T2毒素（T2）是由多種鐮刀菌產(chan) 生的一種黴菌毒素。本ELISA試劑盒采用間接競爭(zheng) ELISA方法，在酶標板微孔條上預包被T2毒素抗原，樣本中T2毒素和此抗原競爭(zheng) T2毒素抗體(ti) ，同時T2毒素抗體(ti) 與(yu) 酶標二抗相結合，經TMB底物顯色，樣本吸光值與(yu) 其含有的T2毒素成負相關(guan) ，與(yu) 尺度曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣品中T2毒素的含量。主要汙染小麥、大麥、玉米等糧食作物及其製品，對人類健康及畜牧業(ye) 構成了較大危害。

檢測步驟

1、將所需試劑從(cong) 冷藏環境中取出，置於(yu) 室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體(ti) 試劑使用前均須搖勻。

2、取出需要數量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中並且與(yu) 提供的幹燥劑一起重新密封，保存於(yu) 2～8℃。不要冷凍。

3、洗滌工作液在使用前也需回溫。

4、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個(ge) 樣本和標準品做2孔平行，並記錄標準孔和樣本孔所在的位置。

5、加標準品/樣本：加標準品/樣本50l到對應的微孔中，加入T2毒素酶標物50l/孔，再加入T2毒素抗試劑50l/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板後置室溫避光環境中反應30min。

6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nei) 液體(ti) 甩幹，用洗滌工作液300l/孔，充分洗滌5次，每次間隔30s，用吸水紙拍幹（拍幹後未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。

7、顯色：加入底物液A液50l/孔，再加底物液B液50l/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板後置室溫避光環境反應15～20min。

8、測定：加入終止液50l/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀(yi) 於(yu) 450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，請在5min內(nei) 讀完數據），測定每孔OD值。(若無酶標儀(yi) ，則不加終止液用目測法可進行判定)。

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